使用说明
² 产品简介
本品为大肠杆菌Mach1-T1(基因型:F- φ80(lacZ)ΔM15 ΔlacX74 hsdR(rK
- mK+) ΔrecA1398 endA1 tonA)制作的高效感受态,是目前生长速度较快的感受态细胞之一,在平板上9 h可见克隆,缺失核酸内切酶 (endA),提高了质粒DNA 的产量和质量;重组酶缺陷型 (recA1398)减少插入片段的同源重组概率,保证了插入DNA 的稳定性;lacZΔM15的存在使Mach1-T1可用于蓝、白斑筛选;tonA突变赋予Mach1-T1菌株对噬菌体T1和T5的抗性。Mach1-T1感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率>109 cfu/μg DNA。
² 产品规格
品名 | 货号 | 规格 |
Mach1-T1化学转化感受态 | EC019H-S | 10×100 μL |
| EC019H-M | 50×100 μL |
-80℃(12个月)
² 转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒或连接产物,轻弹使混合均匀,并在冰中孵育30min;
2. 放42℃水浴锅中热激90 s,立即插入冰中静置2-3 min;
3. 添加900 μL LB液体培养基,37℃摇床220 rpm培养60 min;
4. 离心(质粒转化无需离心,吸取100μL菌液涂布即可),倒掉上清,余下菌液均匀涂布抗性平板,37℃培养箱放置过夜。
² 注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。
3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。