使用说明

² 产品简介

本品为大肠杆菌JM110（基因型：rpsL (Str^R) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F′ [traD36 proAB lacI^qlacZΔM15]）制作的高效感受态，菌株具有硫酸链霉素抗性(Str^R)；是甲基化基因dam、dcm 缺失的菌株，提取得到的质粒DNA，可被对dam、dcm 甲基化敏感的内切酶切割；lacI^qlacZΔM15的存在使JM110可以进行蓝白斑筛选，但转化效率不高。JM110 感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19 质粒检测转化效率约10⁷ cfu/μg DNA。

² 产品规格

-80℃（12个月）

² 转化方法

1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒或连接产物，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；

2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min； 

3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min；

4. 离心（质粒转化无需离心，吸取100μL菌液涂布即可），倒掉上清，余下菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜。

² 注意事项

1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。

2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。

3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。