使用说明
² 产品简介
本品为大肠杆菌JM109(基因型:endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17(rk-,mk+) relA1 supE44 D (lac-proAB) [F´ traD36 proAB laqIqZΔM15])制作的高效感受态,是提取高质量DNA的理想菌株,recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。携带hsdR17基因型背景,使得异源DNA不被内源核
酸酶系统降解。laqIqZΔM15的存在使JM109可用于构建克隆,蓝白斑筛选实验。JM109感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒(2686bp,AmpR)检测转化效率>109 cfu/μg DNA。
² 产品规格
品名 | 货号 | 规格 |
JM109化学转化感受态 | EC016H-S | 20×100 μL |
| EC016H-M | 100×100 μL |
-80℃(12个月)
² 转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒或连接产物,轻弹使混合均匀,并在冰中孵育30min;
2. 放42℃水浴锅中热激90 s,立即插入冰中静置2-3 min;
3. 添加900 μL LB液体培养基,37℃摇床220 rpm培养60 min;
4. 离心(质粒转化无需离心,吸取100μL菌液涂布即可),倒掉上清,余下菌液均匀涂布抗性平板,37℃培养箱放置过夜。
² 注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。
3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。