产品中心

JM109

使用说明

² 产品简介

本品为大肠杆菌JM109(基因型:endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17(rk-,mk+) relA1 supE44 D (lac-proAB) [F´ traD36 proAB laqIqZΔM15]制作的高效感受态,是提取高质量DNA的理想菌株,recA1endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。携带hsdR17基因型背景,使得异源DNA不被内源核

酸酶系统降解。laqIqZΔM15的存在使JM109可用于构建克隆,蓝白斑筛选实验。JM109感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒(2686bpAmpR)检测转化效率>109 cfu/μg DNA

 

² 产品规格

 

品名

货号 

规格

JM109化学转化感受态

EC016H-S

20×100 μL


EC016H-M

100×100 μL

-80℃(12个月)

 

² 转化方法

1. -80 冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒或连接产物轻弹使混合均匀,并在冰中孵育30min

2. 42℃水浴锅中热激90 s,立即插入冰中静置2-3 min 

3. 添加900 μL LB液体培养基,37℃摇床220 rpm培养60 min

4. 离心(质粒转化无需离心,吸取100μL菌液涂布即可),倒掉上清,余下菌液均匀涂布抗性平板,37℃培养箱放置过夜。

 

² 注意事项

1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。

2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。

3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。