使用说明
² 产品简介
ATCC25922菌株是最常用用的药敏质控菌株,主要用于药物的敏感度测试;也可用于培养基、染色剂、生化试剂和各种大肠相关试剂盒的性能测试。ATCC25922未经人工改造,为野生型菌株,是头孢氨苄、卡那霉素、庆大霉素、氯霉素、四环素、新霉素等抗生素的敏感型标准菌种,不含核酸酶endA1突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去除菌体内大量的核酸酶。ATCC25922感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒(2686bp,AmpR)检测转化效率>1×107 cfu/μg DNA。
² 产品规格
品名 | 货号 | 规格 |
ATCC25922化学转化感受态 | EC013H-S | 10×100 μL |
| EC013H-M | 50×100 μL |
保存条件:-80℃(12个月)
² 转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒或连接产物,轻弹使混合均匀,并在冰中孵育30min;
2. 放42℃水浴锅中热激90 s,立即插入冰中静置2-3 min;
3. 添加900 μL LB液体培养基,37℃摇床220 rpm培养60 min;
4. 离心(质粒转化无需离心,吸取100μL菌液涂布即可),倒掉上清,余下菌液均匀涂布抗性平板,37℃培养箱放置过夜。
² 注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。
3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。