使用说明
² 产品简介
本品为大肠杆菌ER2738(基因型:[F´proA+B+ lacIq Δ(lacZ)M15 zzf::Tn10 (tetR)] fhuA2 glnVΔ(lac-proAB) thi-1Δ(hsdS-mcrB)5)制作的高效感受态,是主要的噬菌体展示用菌株,同时也可用于质粒构建,蛋白表达等实验,含有F'因子,可用于M13噬菌体的扩繁。lacIqZΔM15的存在使其可以用于蓝白斑筛选等实验;但不含核酸酶endA1突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去除菌体内核酸酶。ER2738菌株具有四环素抗性。ER2738感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒(2686bp,AmpR)检测转化效率>1×109。
² 产品规格
品名 | 货号 | 规格 |
ER2738化学转化感受态 | EC011H-S | 10×100 μL |
| EC011H-M | 50×100 μL |
保存条件:-80℃(12个月)
² 转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒或连接产物,轻弹使混合均匀,并在冰中孵育30min;
2. 放42℃水浴锅中热激90 s,立即插入冰中静置2-3 min;
3. 添加900 μL LB液体培养基,37℃摇床220 rpm培养60 min;
4. 离心(质粒转化无需离心,吸取100μL菌液涂布即可),倒掉上清,余下菌液均匀涂布抗性平板,37℃培养箱放置过夜。
² 注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。
3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。