使用说明
一、产品简介
本品为大肠杆菌M15(pREP4){基因型：F-, Φ80ΔlacM15, thi, lac-, mtl-, recA+, KmR}制作的感受态。该菌种蛋白表达菌株含pREP4质粒，该质粒通过p15A 复制子启动复制，可以与许多原核表达质粒共存于同一大肠杆菌细胞中；同时该质粒携带lac I基因，可高效表达lac抑制蛋白，在IPTG诱导前可抑制目标蛋白的本底表达，特别适合毒性基因的表达。M15(pREP4)菌株是PQE 系列质粒的配套菌株，特别适合PQE系列质粒或由E.coli T5启动子诱导表达的质粒的蛋白表达。pREP4质粒赋予该菌株卡那霉素抗性。M15(pREP4)感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19 质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>2×108cfu/μgDNA。
二、产品规格
品名 | 货号 | 规格 |
M15(pREP4)化学转化感受态 | EE018-H-S | 10×100 μL |
| EE018-H-M | 50×100 μL |
-80℃（12个月）
三、转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min；
4. 吸取100μL菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜。
四、注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。
3. 诱导蛋白表达时，IPTG 浓度可选（0.1-2 mM 均可）。