使用说明
² 产品简介
本品为大肠杆菌BL21 (DE3) [基因型:F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm(DE3)]制作的高效感受态。该菌整合了λ噬菌体DE3区(该区域含有T7噬菌体RNA聚合酶);同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于PET、pGEX和pMAL等质粒的蛋白表达。pUC19 质粒检测转化效率>107 cfu/μg DNA。
² 产品规格
品名 | 货号 | 规格 |
BL21(DE3)化学转化感受态 | EE008-H-S | 10×100 μL |
BL21(DE3)化学转化感受态 | EE008-H-M | 50×100 μL |
保存条件:-80℃(12个月)
² 转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒,轻弹使混合均匀,并在冰中孵育30min;
2. 放42℃水浴锅中热激90 s,立即插入冰中静置2-3 min;
3. 添加900 μL LB液体培养基,37℃摇床220 rpm培养60 min;
4. 吸取100μL菌液均匀涂布抗性平板,37℃培养箱放置过夜。
² 注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。
3. 诱导蛋白表达时,IPTG 浓度可选(0.1-2 mM 均可)。