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BL21(DE3)

使用说明


²  产品简介

  本品为大肠杆菌BL21 (DE3) [基因型:F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm(DE3)]制作的高效感受态。该菌整合了λ噬菌体DE3区(该区域含有T7噬菌体RNA聚合酶);同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于PETpGEXpMAL等质粒的蛋白表达。pUC19 质粒检测转化效率>107 cfu/μg DNA

 

²  产品规格

 

品名

货号  

规格

BL21DE3)化学转化感受态

EE008-H-S

10×100 μL

BL21DE3)化学转化感受态

EE008-H-M

50×100 μL

保存条件:-80℃(12个月)

 

²  转化方法

1. -80 ℃冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒,轻弹使混合均匀,并在冰中孵育30min

2. 42℃水浴锅中热激90 s,立即插入冰中静置2-3 min

3. 添加900 μL LB液体培养基,37℃摇床220 rpm培养60 min

4. 吸取100μL菌液均匀涂布抗性平板,37℃培养箱放置过夜。

 

²  注意事项

1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。

2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。

3. 诱导蛋白表达时,IPTG 浓度可选(0.1-2 mM 均可)。