使用说明
一、产品简介
本品为大肠杆菌BL21 (DE3)pLysS [基因型：F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm(DE3) pLysS CamR]制作的高效感受态。该菌整合了λ噬菌体DE3区（该区域含有T7噬菌体RNA聚合酶）；同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于PET、pGEX和pMAL等质粒的蛋白表达；菌株携带有pLysS质粒，具有氯霉素抗性，pLysS含有表达T7溶菌酶的基因，T7溶菌酶可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽寡聚糖，溶解大肠杆菌，降低目的基因的背景表达，但不干扰IPTG诱导的表达，适合表达毒性蛋白；pUC19 质粒检测转化效率>107 cfu/μg DNA。
二、产品规格
品名 | 货号 | 规格 |
BL21（DE3）pLysS化学转化感受态 | EE009-H-S | 10×100 μL |
| EE009-H-M | 50×100 μL |
-80℃（12个月）
三、转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min；
4. 吸取100μL菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜。
四、注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。
3. 诱导蛋白表达时，IPTG 浓度可选（0.1-2 mM 均可）。