产品中心

BL21

使用说明

一、产品简介

    本品为大肠杆菌BL21{基因型:E. coli B F- dcm omphsdS(rB- mB-gal [malB+]K-12S)}制作的感受态BL21是最早开发的用于原核表达的菌株,BL21 (DE3)RosettaOrigamiB (DE3)等菌株均由该菌株改造而来;该菌株不含有T7 RNA聚合酶,不能用于T7启动子驱动的蛋白表达(如:PET系列质粒);该菌含有大肠杆菌RNA聚合酶,可用于tactrc等使用大肠杆菌RNA聚合酶的原核表达系统(如:pGEXpMAL等质粒);pUC19 质粒检测转化效率>107 cfu/μg DNA

 

二、产品规格

 

品名

货号

规格

BL21化学转化感受态

EE005-H-S

10×100 μL


EE005-H-M

50×100 μL

-80℃(12个月)

 

三、转化方法

1. -80 冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒轻弹使混合均匀,并在冰中孵育30min

2. 42℃水浴锅中热激90 s,立即插入冰中静置2-3 min 

3. 添加900 μL LB液体培养基,37℃摇床220 rpm培养60 min

4. 吸取100μL菌液均匀涂布抗性平板,37℃培养箱放置过夜。

 

四、注意事项

1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。

2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。

3. 诱导蛋白表达时,IPTG 浓度可选(0.1-2 mM 均可)。