DB3.1化学转化感受态使用说明
² 产品简介
本品为大肠杆菌DB3.1（基因型：F- gyrA462 endA1 glnV44 Δ(sr1-recA) mcrB mrr hsdS20(rB-, mB-) ara14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(SmR) xyl5 Δleu mtl1）制作的高效感受态，菌株基因组中含有gyrA462 基因，赋予其对ccdB 毒性基因的抗性，特别适用于构建或扩繁含有ccdB 基因的质粒载体 (例GATEWAY System vector)，此菌株具有链霉素抗性。DB3.1 感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19 质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>108 cfu/μg DNA。
² 产品规格
品名 | 货号 | 规格 |
DB3.1化学转化感受态 | EC004H-S | 10×100 μL |
| EC004H-M | 50×100 μL |
-80℃（12个月）
² 转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒或连接产物，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min；
4. 离心（质粒转化无需离心，吸取100μL菌液涂布即可），倒掉上清，余下菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜。
² 注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。
3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。