使用说明
一、产品简介
本品为大肠杆菌S17-1 λpir（基因型：RP4-2(Km::Tn7,Tc::Mu-1), pro-82, LAMpir, recA1, endA1, thiE1, hsdR17, creC510）制作的高效感受态，菌株的染色体中整合了RP4-2质粒，该质粒可以携带染色体的部分DNA在接合菌株之间转移。S17- 1 λpir菌株缺失核酸内切酶 (endA1)，提高了质粒DNA的产量和质量；同时为重组酶缺陷型 (recA1)，减少插入片段的同源重组概率，保证了插入DNA的稳定性。Tn7赋予该菌株弱的链霉素抗性。S17-1 λpir感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>108 cfu/μg DNA。
二、产品规格
品名 | 货号 | 规格 |
S17-1 λpir化学转化感受态 | EC028H-S | 10×100 μL |
| EC028H-M | 50×100 μL |
保存条件：-80℃（12个月）
三、转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒或连接产物，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min；
4. 离心（质粒转化无需离心，吸取100μL菌液涂布即可），倒掉上清，余下菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜。
四、注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。
3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。