使用说明
² 产品简介
本品为大肠杆菌BW25113（基因型：F-, DE(araD-araB)567, lacZ4787(del)::rrnB-3, LAM-, rph-1, DE(rhaD-rhaB)568, hsdR514）制作的高效感受态，菌株来源于E. coli K-12 W1485，是K12的衍生菌株，与MG1655类似，也是一种经过较少改造，比较接近于“野生型”的大肠杆菌工程菌株。BW25113作为母系菌株，可以用来制作E. coli Keio Knockout文库；同时可作为大肠杆菌模式菌株使用，用来制作各种基因的Knockout突变体。另外，BW25113可用于构建，扩繁质粒使用，不含核酸酶endA1突变，体内核酸酶含量较高，提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中去蛋白液尽量去除核酸酶，以防提取的质粒被降解。pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>0.5×109 cfu/μg DNA。
² 产品规格
品名 | 货号 | 规格 |
BW25113化学转化感受态 | EC003H-S | 10×100 μL |
| EC003H-M | 50×100 μL |
保存条件：-80℃（12个月）
² 转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒或连接产物，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min；
4. 离心（质粒转化无需离心，吸取100μL菌液涂布即可），倒掉上清，余下菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜。
² 注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。
3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。