使用说明
一、产品简介
本品为大肠杆菌NovaBlue(DE3){基因型：F`[ proA+B+ lacIq ZΔM15::Tn10 (TetR)] endA1 hsdR17(rk12-,mk12+) supE44 thi -1 recA1 gyrA96 relA1 lac(DE3)}制作的感受态。该菌种来源于K12菌株，具有极高的转化效率，是转化效率最高的原核表达菌株，可同时用于普通质粒的构建和蛋白的原核表达。NovaBlue(DE3)菌株染色体DNA中整合了λ噬菌体DE3区，使得NovaBlue(DE3)菌株可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，广泛用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。NovaBlue(DE3)菌株具有四环素抗性，endA1和recA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取；lacZΔM15的存在使NovaBlue(DE3)可用于蓝、白斑筛选。NovaBlue(DE3)感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>109cfu/μg DNA。
二、产品规格
品名 | 货号 | 规格 |
NovaBlue(DE3)化学转化感受态 | EE019-H-S | 10×100 μL |
| EE019-H-M | 50×100 μL |
-80℃（12个月）
三、转化方法
1. 从-80 ℃ 冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃ 水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃ 摇床220 rpm培养60 min；
4. 吸取100μL菌液均匀涂布抗性平板，37℃ 培养箱放置过夜。
四、注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。
3. 诱导蛋白表达时，IPTG 浓度可选（0.1-2 mM 均可）。