使用说明
一、产品简介
本品为GV2260根癌农杆菌化学转化感受态,具有Rif抗性,可用于DNA的化学转化,经植物双元pCAMBIA2301M质粒检测转化效率高达103 cfu/μg DNA。
二、产品规格
品名 | 货号 | 规格 |
GV2260化学转化感受态 | AT005-H-S | 10×100 μL |
| AT005-H-M | 50×100 μL |
保存条件:-80℃(12个月)
三、转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒(约500 ng),轻弹使混合均匀;
2. 冰中孵育5 min,液氮中放置5 min,放37℃水浴锅中热激5 min,立即插入冰中静置5 min;
3. 添加900 μL YEB液体培养基,28℃摇床220 rpm培养2-3 h;
4. 5000 rpm离心,倒掉上清,余下菌液均匀涂布抗性平板,28℃培养箱放置2-3天。
四、注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。
3. 利福平使用浓度<25 μg/ml。过高的利福平浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。