使用说明
² 产品简介
本品为大肠杆菌Turbo(基因型:F' proA+B+ lacIqΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB) glnV galK16 galE15 R(zgb-210::Tn10) TetS endA1 thi-1Δ(hsdS-mcrB)5)制作的高效感受态。Turbo菌株是生长最快的大肠杆菌菌株之一。平板上6.5小时可见克隆,营养液中摇菌4-6小时可提取质粒,缺失核酸内切酶 (endA),提高了质粒 DNA的产量和质量;Turbo菌株可严格控制laclq的表达,可以克隆毒性基因;fhuA2突变赋予Turbo菌株对噬菌体T1的抗性;lacZΔM15的存在使Turbo可用于蓝、白斑筛选。Turbo感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒(2686bp,AmpR)检测转化效率>5×108 cfu/μg DNA。
² 产品规格
品名 | 货号 | 规格 |
Turbo化学转化感受态 | EC032H-S | 10×100 μL |
| EC032H-M | 50×100 μL |
保存条件:-80℃(12个月)
² 转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒或连接产物,轻弹使混合均匀,并在冰中孵育30min;
2. 放42℃水浴锅中热激90 s,立即插入冰中静置2-3 min;
3. 添加900 μL LB液体培养基,37℃摇床220 rpm培养60 min;
4. 离心(质粒转化无需离心,吸取100μL菌液涂布即可),倒掉上清,余下菌液均匀涂布抗性平板,37℃培养箱放置过夜。
² 注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。
3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。