使用说明

一、产品简介

本品为大肠杆菌Stbl4[基因型：F′ proAB+ lacI^qZ∆M15 Tn10 (Tet^R)mcrA ∆(mcrBC-hsdRMS-mrr) recA1 endA1 gyrA96 gal- thi-1 supE44 λ relA1∆(lac-proAB)]制作的高效感受态。该菌来源于大肠杆菌Stbl2，可用于慢病毒载体或逆转录病毒载体的构建。Stbl4菌株适合克隆不稳定插入片段 (正向重复序列，逆转录病毒序列等)；mcrA 突变和mcrBC-hsd RMS-mrr deletion 使该菌株更适于克隆甲基化的基因组序列。recA 1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。lacI^qZΔM15标记使得Stbl4菌株可用于蓝、白斑筛选。此菌株具有四环素抗性。Stbl4感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，Amp^R）检测转化效率>10⁸ cfu/μg DNA。

二、产品规格

保存条件：-80℃（12个月）

三、转化方法

1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；

2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min； 

3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min（质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概）；

4. 吸取100μL菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜（质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概）。

四、注意事项

1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。

2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。